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Título: Espécies de flebotomíneos no estado do Amapá, Brasil
Autores: SANCHES, Rafaela dos Santos Silva
Orientador: MARTINS, Emerson Augusto Castilho
Lattes do Orientador: http://lattes.cnpq.br/9172895295920183
Tipo de Documento: Dissertação
Citação: SANCHES, Rafaela dos Santos Silva. Espécies de flebotomíneos no estado do Amapá, Brasil. Orientador: Emerson Augusto Castilho Martins. 2020. 81 f. Dissertação (Mestrado em Ciências da Saúde) – Departamento de Pós-Graduação, Universidade Federal do Amapá, Macapá, 2020. Disponível em: http://repositorio.unifap.br:80/jspui/handle/123456789/843. Acesso em:.
Resumo: Os insetos denominados flebotomíneos têm importância médica por serem os vetores de Leishmanioses. Esses insetos pertencem à Ordem Díptera, Família Psychodidae, Subfamília Phlebotominae, e são conhecidos popularmente como mosquito palha, tatuquira, birigui, entre outros. Os flebotomíneos têm distribuição diferenciada no território brasileiro e no mundo. A diversidade de espécies de flebotomíneos, bem como a composição de uma comunidade, são resultados de interações ecológicas e aspectos geográficos locais. A identificação de uma espécie vetor e a identificação da taxa de infecção natural, principalmente nas regiões endêmicas, é de fundamental importância na entomologia médica. Esta pesquisa visa determinar o padrão de distribuição das espécies de flebotomíneos nos municípios do estado do Amapá, através da identificação dos flebotomíneos apartir da técnica do DNA Barcoding, e ainda, identificar os municípios onde há a presença de Flebotomíneos de importância médica, bem como inferir a relação evolutiva dos espécimes identificados. Os insetos foram coletados com o uso de armadilhas CDC, localizadas a 50m, 100m e 150m da borda da mata, em todos os municípios do Estado do Amapá. Foram armazenados em etanol 70%, e o DNA foi extraído pela Proteinase K seguido pelo método do fenol / clorofórmio. Usamos a subunidade I (COI) da citocromo C oxidase (~700pb) como marcador, que foi sequenciado com o método de Sanger, obtendo uma sequencia de 550 a 650pb. Apartir disto foi feita a análise comparativa das sequêncicas nos Bancos de Dados do NCBI e BOLD. Como resultado foram coletadas 599 Flebotomíneos, sendo 340 fêmeas e 259 machos. Após amplificação por PCR da região do gene COI do DNA mitocondrial, foi possível obter 332 amostras amplificadas, sendo 103 delas submetidas ao sequenciamento Sanger. Um total de 84 amostras apresentaram sucesso no sequênciamento, e estas foram analisadas junto aos bancos de dados, sendo possível identificar 67 espécimes em nível de espécie e 17 somente em nível de gênero. Nesta pesquisa, identificou-se no total a ocorrência de 15 espécies de flebotomíneos circulante no estado do Amapá, a espécie mais frequente foi Nyssomyia antunesi. Os gêneros com mais frequência neste estudo foram Nyssomyia, Trichopygomyia e Bichromomyia. As espécies de importância médica registradas neste estudo foram Bichromomyia flaviscutellata, Nyssomyia umbratilis e Psychodopygus squamiventris squamiventris. Nossos resultados mostraram que o gene COI pode ser usado como uma ferramenta eficiente para identificar espécies de flebotomíneos; no entanto, não pode ser usado como única ferramenta, uma vez ainda existe algumas inconsistências na identificação genética, incluindo limitações nos bancos de dados e erros, assim, sugere-se que a identificação molecular seja usada em combinação com a análise morfológica.
Abstract: Phlebotomines are insects with medical importance, since they can transmit Leishmania. They are Diptera from Phlebotominae subfamily belonging to the Psycodidae family, popular know as sand flies. The phlebotomines are diferentialy distributed in Brazil as well as in other countries, being their biological diversity a result of interaction between ecological interactions and geographic characteristics. This brings up a medical importance of species distribution across endemic areas of Leishmaniose as occours in Amapa State, Brazil. This research aimed to identify the ecological phlebotomines distribution in the Amapá State, on the Amazon region of Brazil, as well as to identify in which cities of the State have medical importat phlebotomines. The insects was collected using CDC-type light traps, located at 50m, 100m and 150m far from an forest border, in all cities of Amapá State. They were stored in ethanol 70%, and the DNA was extracted by Proteinase K followed by phenol/chloroform method. We used cytochrome C oxidase subunit I (COI) as template to amplify a 550-650 base pairs fragment, which was sequenced with Sanger’s method. The sequences obtained was analysed by BOLD and NCBI databases. As result, it was obtained 599 phlebotomines, with 340 females and 259 males. After the PCR amplification of COI gene, it was possible to obtain 332 positive samples, and 103 of them was submitted to Sanger sequencing. A total of 84 sequenced samples was submitted to databases, and it was possible to identify 67 specimens al specie level and 17 at genera level. There was 15 species of sandflies, with Nyssomyia antunesi as the most frequent. The genera more frequent was Nyssomyia, Trichopygomyia and Bichromomyia. The medical importat speceis colected was Bichromomyia flaviscutellata, Nyssomyia umbratilis and Psychodopygus squamiventris squamiventris. Our results show that the COI gene can be used as an efficient tool to identify sandflies species; however, it can not be used as the only tool, since there was some inconsistencies in the genetic identification, including databases limitations and erros, so we can suggest that molecular identification could be used in combination with morphological analisys.
Palavras-chave: Insetos - Amapá
Flebotomíneo – Vetor biológico
Leishmanioses - Vetores
Entomologia médica
Área do conhecimento: CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE
Editor: UNIFAP - Universidade Federal do Amapá
País da Instituição: Brasil
Fonte do Documento: Via SIPAC
Aparece nas coleções:Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde - PPGCS

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